PBMC Protocol

krioprezervált perifériás vér mononukleáris sejtek ( PBMC) gyakori forrása a példányok a kutatás , amely magában foglalja immunterápiák és válaszok vakcinák . Míg egyes protokollok korlátozódnak izolálása és fagyasztás szakaszainak a folyamat , mások is felolvasztás eljárásokat. Elválasztás és Fagyasztás Eljárás Matton

Egy vegyület kereskedelmi szétválasztás elősegítése kerül minden egyes 50 ml-es centrifuga csőbe, és a csöveket centrifugáltuk, harminc másodpercig. Sapkák vér csövek permetezzük alkohollal nyitás előtt, majd antikoaguláns kezelt teljes vért ezután átvisszük keresztül pipettával a centrifuga csövekbe. A réteg a plazma a vér pipettával leszívjuk .
Fagyasztás

A sejteket az előző lépésben ezután centrifugáljuk pufferolt sóoldattal háromszor. Miután a sejtszám, a próbatesteket ezután centrifugáljuk kerül fagyasztás közegben szuszpendáljuk . Példányok fagyos közegben következő megoszlik kriofiolákban egy ml mennyiségben . Ampullák tárolása egy éjszakán át

-70 º C- fagyasztó , és költözött a hosszú távú tárolása folyékony nitrogénben másnap .
Safe kiolvasztás

kriofiolákban át a folyékony nitrogént a 37 º C-os vízfürdőbe , és mintát szabad felengedni egy-két percig . A meleg közeget adtunk minden injekciós üveg . A hígított sejtszuszpenziót centrifugáljuk hét perc. A szám és a sejtek életképességét ellenőrzik , ha a sejtek szüksége koncentráló , a mintákat centrifugáltuk hét percig . A mintát hígított munkaoldatot és pihent 12-18 órával megkezdése előtt vizsgálatot a megadott protokollt.