Hogyan változik a BAPNA emésztésének mennyisége az idő függvényében?

A BAPNA (benzoil-DL-arginin-p-nitroanilid) tripszinnel történő emésztése tipikus Michaelis-Menten enzimkinetikát követ. Az emésztés sebessége kezdetben idővel növekszik, ahogy több enzimmolekula vesz részt a reakcióban. Mivel azonban a szubsztrát koncentrációja idővel csökken, az emésztés sebessége lelassul. Az emésztett BAPNA mennyisége és az idő közötti összefüggés a következő egyenlettel írható le:

[BAPNA]t =[BAPNA]0 - k[E][BAPNA]0*t

Ahol:

- [BAPNA]t:A t időpontban emésztett BAPNA mennyisége

- [BAPNA]0:A BAPNA kezdeti koncentrációja

- k:A reakció sebességi állandója

- [E]:A tripszin koncentrációja

- t:Idő

A [BAPNA]t versus t diagramja jellemzően hiperbolikus görbét mutat. A görbe kezdeti lineáris fázisa azt az időszakot jelenti, amikor a reakció sebessége állandó és arányos az enzimkoncentrációval. A reakció előrehaladtával a görbe kiegyenlítődik a szubsztrát kimerülése és az emésztés csökkenő sebessége miatt.

A reakció kezdeti sebességének (Vo) mérésével és a Michaelis-Menten-állandó (Km) grafikus elemzéssel (pl. Lineweaver-Burk vagy Hanes-Woolf diagramok) történő meghatározásával jellemezhető az enzimkinetika, és betekintést nyerhetünk a katalizátorba. a tripszin hatékonysága és szubsztrát-affinitása a BAPNA-hoz.