Különbség Közvetlen és közvetett ELISA-

Egy enzim -kapcsolt immunszorbens vizsgálattal ( ELISA), magában foglalja a reakció egy antitest - enzim komplexet egy antigén vagy antitest mozdulatlanul tartott egy szilárd felületre. A inkubációs A konjugált enzim szubsztrátot egy alkalmas , a termék képződik. A formáció egy termék segít jelenlétének kimutatására az antigén vagy antitest mennyisége és annak mérését biztosítja az összeg antigén- antitest reakció , hogy történt . Az ELISA vizsgálat elvégezhető két formája van: a közvetlen és közvetett . Test Format

direkt ELISA teszt , elsődleges antitestet tartanak a falakon a mikrotitrálólemez . Amikor a minta gyaníthatóan tartalmazza az antigént adunk hozzá , akkor egy antigén- antitest reakció. Ezután egy enzimmel kapcsolt szekunder antitest , amely képes reagálni az antigénnel adunk hozzá. Ha az antigén jelen van a mintában , ez kötődik az enzim -kapcsolt antitest. Amikor egy színtelen szubsztrátot adunk , ha a szín alakul ki, ez jelzi az antigén jelenlétét . Az indirekt ELISA antigént tartott a falakon a mikrotiter lemez. Amikor egy minta gyaníthatóan tartalmaz antitesteket adunk hozzá, egy antigén- antitest reakció lép fel. Ezután egy enzimmel kapcsolt szekunder antitesttel , amely képes reakcióba lép a régió a kötetlen antitestet adunk hozzá. Amikor a színtelen szubsztrátot adunk , ez vezet a fejlődés a színt, ha a felhasznált minta tartalmaz ellenanyagokat.
Könnyű tesztelés Matton

A széles jelzett szekunder antitestek kereskedelmileg áll . Emellett lehetőség van arra , hogy hozzon létre több primer antitestek egy adott faj és használja ugyanazt a másodlagos antitest kimutatására . Ez teszi az indirekt ELISA- könnyű végrehajtani. A közvetlen ELISA-val , az elsődleges ellenanyagok specifikusan kell legyen ahhoz, hogy készen reagálnak a specifikus antigén feltételezett , hogy jelen legyen a mintában. Ez teszi a közvetlen ELISA kedvezőtlen , mint az indirekt tesztet.
Gyorsasága Testing

A direkt ELISA teszt gyorsan képest az indirekt teszt , mert használ csak egyetlen antitest. Az indirekt ELISA igényel további lépést az inkubáció második antitesttel a vizsgálati eljárás során , ami a késés eredményeket.
Érzékenység

A direkt ELISA teszt kevésbé érzékeny , mint a közvetett formában a vizsgálat , mert van sokkal kevesebb jel erősítés. Különben is , a címkén az elsődleges antitest egy olyan enzim, csökkentik a immonoreactivity profil . Abban az esetben, a közvetett ELISA , az elsődleges antitest nem jelölt , és ezért megtartja immunreaktivitást . Emellett , minden primer antitest számos epitópok , amelyek kötődnek a szekunder antitesttel , ez lehetővé teszi a jel erősítés , javítja az eljárás érzékenységét. Azonban van esély a kereszt-reaktivitás között az antigén és a másodlagos antitest , ami a hibát az eredményeket. Nincs ilyen lehetőség a direkt ELISA módszerrel .