Egészség és a Betegség
Vegyen fel egy pár latex vagy nitril kesztyűt , hogy felkészítse a LB húslevest. LB tápleves egy gyakori rövidítése Lysogeny húsleves, vagy Luria húsleves, és ez olyan , mint egy használt táptalajok baktériumok tenyésztésére . Ez lehet a semmiből a laboratóriumban , vagy hogy időt takaríthat meg lehet megvásárolni minden molekuláris biológia állomány szállítója .
2
Helyezzen egy lapot súlyú papír a skálán . Nyomja meg a nullázás gombot a skálán , így a súlya a papír nem szerepel a végső tömegét . Add hozzá kis mennyiségű tripton egy időben , amíg az el nem éri a 10 g . Ezután hajtsa a súlya papírt felében a trip közepén . Vedd fel a súlya papírt és gondosan összehajtogatott papírt , mint egy tölcsér , hogy adjunk a trip- a 2 L- lombikba. Kövesse az alábbi eljárást kell mérlegelnie 5 g élesztőkivonat , 10 g nátrium-kloridot és 15 g agar .
3
Dobd el a keverőbabát a lombikba, és középre a lombikot a mágneses keverjük lemez. Adjunk hozzá annyi desztillált vizet, hogy az oldatot 1 literre .
4
be a keverjük lemezt , és nézni a keverjük bárban. A lemezt kell állítani a megfelelő sebességet , hogy a keverjük sáv mozog mérsékelt ütemben anélkül, hogy megragadt az oldalán a lombik . A beállításokat , ha szükséges. Hagyja, hogy a megoldás , hogy üljön a lemezt, amíg az összes reagenst feloldódtak .
5
Kapcsolja ki a lemezt keverjük , és nyúlik egy 3 cm-es négyzet alakú darab parafilmmel fölött a lombik , az fedi és védi a lombikot minden szennyeződést vagy ömlött . Ezután kiterjed a parafilmmel egy darab alumínium fóliát , és adjunk hozzá egy darab szalag jelölés autokláv tetején a fólia . Matton 6
Helyezzük az oldatot egy autoklávban folyékony ciklus 20 percen át 15 psi sterilizálja azt.
7
Vegyük ki a lombikot az autokláv . Ez lesz nagyon meleg. Hagyjuk lehűlni az oldatot mintegy 55 Celsius fok, azáltal , hogy üljön szobahőmérsékleten , vagy azáltal, hogy a lombikot 65 ° C vízfürdőben .
8
Spray , és törölje le a munka felület 95 százalék etanolt szennyeződés megelőzése érdekében. Ez is egy jó ötlet, hogy változtassa meg a kesztyűt kezelése előtt a lemezek .
9
Mark oldalán és a fedél minden egyes lemez függőleges kék sáv a jelölés tollat. Ez azt jelzi, a lemezek LB húsleves és chloramphenicol .
10
Adjunk hozzá annyi chloramphenicol antibiotikum a megoldás , hogy a koncentrációja eléri a kívánt összeget , attól függően, hogy a baktérium akkor dolgozni . A közös végső koncentráció 100ug/ml . Mert ez a koncentráció , adjunk hozzá 1 ml chloramphenicol állomány ( at 25mg/ml ) . Örvény a lombik körkörös mozdulatokkal , vagy helyezze vissza a mágnes keverjük lemezt 1-2 percre , hogy megbizonyosodjon arról, hogy jól kevert .
11
Törölje le a szája a lombik etanollal , , majd öntsük az oldatot a lapok, amíg el nem félig tele a megoldást. Hagyja, hogy a lemezek megkeményedik , kiterjed minden tányér fedővel , és tárolja azokat fejjel lefelé a 4 Celsius-fok , hogy megakadályozzák őket a kiszáradástól .