CFU protokollok

Colony - képző egység vagy CFU , az intézkedés a mikroorganizmus számokat. Ellentétben más módszerek , mint például a közvetlen mikroszkopikus ahol elpusztult és élő mikroorganizmusokat tartják , a CFU protokollok segítségével biológusok számolni egyetlen életképes sejteket. Szabványos intézkedés egységek telepképző egységek milliliterenkénti folyadékokhoz és telepképző egységek grammonkénti a szilárd anyagok. CFU protokollok széles körben használják a biotechnológiai kutatás. CFU -MK vizsgálata akut thrombocytopenia Protocol

Megakariocyte vagy MK , egyfajta csontvelő sejtek termel vérlemezkék . Ezt a protokollt használják a tanulmányok thrombocytopenia, feltétel kapcsolódó alacsony vérlemezke számot . A számlálás előtt , technikusok elő a CFU -MK vizsgálatban az emberi köldökzsinór vérsejtek , Iscove- féle módosított Dulbecco-féle tápközegben , szarvasmarha- kollagén-oldatot , a szérum -mentes táptalajban citokineknek nevezett fehérjék , antitestek az anti- TNP , anti-GPIIb/IIIa és anti - egér IgG-t, Evans-kék Counterstain , Tris /NaCl puffert és szarvasmarha szérum albumint tartalmaz.
Colony assay Mix jegyzőkönyv Matton

Technikusok felkészülni ebben a vizsgálatban a humán plazma , a vegyi anyag 2 - merkaptoetanol , leukocita kondicionált média, a hormon, az eritropoetin és Iscove- féle módosított Dulbecco -féle tápközegben szerint Jeffrey W. Pollard a "Basic Cell Culture Protocols ". Ezt az oldatot azután összekeverjük a sejt- mintákat kell elemezni . Metilcellulóz adunk hozzá, és a mintákat inkubáltuk egy párásított atmoszférában , 5 százalék széndioxid 14 napig.
Migrálása CFU sejtek CD34 CD34

vagy klaszter differenciálás molekulák jelen vannak bizonyos emberi immunodefense sejtek , meghatalmazotti ellenőrzött tapadási tényező a sejt membránok . A sejteket az ilyen fehérjét tartalmazó lehet a képesség, hogy vándorolnak egyik szövetet a másik. Során ezt a protokollt , technikusok mossa mintákat CD34 bevándorolt ​​sejtek eltávolítására cytokynes fehérjék. A mintákat ezután centrifugáljuk és újra szuszpendáljuk tartalmazó tápközegben nőnek tényezők. Megszámolják a telepeket két hét múlva .