Cell fagyasztás Protocol

megőrzése sejtek a fagyasztás elengedhetetlen a kutatás , állatgyógyászat és az állattenyésztés , mert lehetővé teszi a sejtek kell tárolni hosszú ideig . A fagyasztás módszert választott , azonban meg kell rongálódás csökkentése vagy megakadályozása a cellába. A mélyhűtés szer és eljárás függhet a sejttípustól . Előkészítés

Cells be kell fagyasztani , amikor egészséges és aktívan növekszik a 90 százalék életképességét. Ügyelni kell a kezelést és a nagy sebességű centrifugálás és erőteljes pipettázása vagy szívást el kell kerülni , hogy fenntartsák életképességének és megakadályozza sejtkárosodást.
Krioprotekció

krioprotekció ügynök használják a helyett intracelluláris víz . Az ágens megakadályozza jégkristályok és a kiszáradás előforduló a sejtekben. Sterilizált glicerint és sterilizált dimetil gyakran használják koncentrációban 5 százalék és 15 százalék ( térfogat per térfogat ) vagy hígított borjú magzati szérum vagy táptalajok , sejttípustól függően .
Fagyasztás és tárolás

sejtek a fagyos keveréket kell lassan lehűtjük. Ha egy programozható fagyasztó nem áll rendelkezésre, kriofiolákban lehet csomagolni szövetben vagy hungarocell helyezni , ami lassítja a fagyasztási folyamat . A sejteket kell tartani mínusz 80 Celsius fok , és 24 órán át, majd folyékony nitrogénben hosszú távú tárolására .
Felolvasztási

Fagyasztott sejteket kell felolvasztani gyorsan. Vízfürdő 37 Celsius-fokon lehet használni. Ügyelni kell a sejtekkel folyékony nitrogénben tárolják , azonban, mint a folyékony nitrogén beléphet a fiolákat , és felrobbanhat a felolvasztás . A fagyasztás keveréket kell hígítani növekedési médiában. A sejtek életképességének kell értékelni a festék tripánkék és a tenyésztett , mint a normál.