Retrovírus Fertőzés jegyzőkönyvek

Legalább egy RNS genomot , amely körülzárt egy kapszid és a lipid borítékba, retrovírusok polipeptidlánc tartalmaznak , amelyek segítenek , hogy összekapcsolják őket receptorok a sejtek membránjában gazdasejt fertőznek . Míg a legtöbb sejtek örökletes információt kódolt DNS , hogy a retrovírusok RNS tartalmaz; retrovírusok is folytatják az enzim reverz transzkriptáz , amely lehetővé teszi számukra , hogy tartsák be a gazda DNS-t. Bizonyos protokollokat követi laboratóriumok a szándékos fertőzés a DNS- cella ezeket a vírusokat. Előkészítése Laboratórium

Bizonyos laboratóriumi berendezések és kellékek szükségesek , hogy segítse a folyamat a retrovírus fertőzés. A berendezés tartalmaz 1 pipetta támogatás , 1 pipetta - férfi, 1 szövettenyésztés Hood , 37 Celsius-fok és 32 Celsius-fok inkubátor és egy Eppendorf centrifuga . Kellékek közé szövettenyésztő lemezeken , egy eldobható Pasteur pipettával , retrovirális felülúszót képzett , szűrővel sterilizált polibrén és szűréssel sterilizált protamin -szulfát .
Előkészítése Cell a fertőzés

Előzetes fertőzés, célsejteket meg kell osztani egy szövet - kultúra lemez és inkubáltuk egy éjszakán át 37 Celsius -fokos inkubátorban, CO2- öt százalék . A cél a lappangási idő , hogy hozzon létre , amelyek a sejtek 50%-os összefolyó . Előkészítése a sejteket előzetesen szükséges annak biztosítása, hogy a sejtek vannak optimalizálva a fertőzés folyamata . A Nolan Lab a Stanford Egyetemen javasolja, hogy a sejtek a fertőzés mindig kezdődik kezdeni megfertőzni a NIH 3T3 sejtek optimalizálása a vizsgálat eredményei .
Megfertőzze a Cells

Miután a lappangási időszak alatt, biztosítania kell, hogy a kutatók a sejtek mind az egészséges és a jobb torkolatánál . A szövet - kultúra motorháztető, a celluláris anyagot leszívatjuk, és a vírusos felülúszót alkalmazva a sejtekhez . Ha alkalmazzák, a lemezt enyhén rázattuk legyen oda-vissza annak érdekében, hogy egyenletesen oszlik el. A sejteket ezután inokuláljuk a spin - helyezve őket a Eppendorf centrifugában , és fonó őket 2500 rpm kilencven percig hőmérsékleten 30 Celsius fok. Ezután , a sejteket kell inkubálni 32 Celsius-fokon 01:59 napig. A vírus ezután helyébe a kivont sejtek és helyeztek inkubátorba kell elemezni bárhol három-hét napon belül a kezdeti fertőzés .