Hipotézisének tesztelésére Semmelweis kötelező kézmosási protokollt vezetett be klóroldattal. Utasította az orvosokat és a nővéreket, hogy minden egyes beteg vizsgálata előtt mossanak kezet a klóros oldattal. Ennek eredményeként a szülészeti kórház halálozási aránya drámaian csökkent, ami alátámasztotta elméletét.
Semmelweis megállapításai és ajánlásai eleinte kollégái ellenállásba ütköztek, akik szkeptikusak voltak azzal kapcsolatban, hogy a kezük lehet a fertőzés forrása. Idővel azonban a kézhigiénia fontossága egyre inkább elismertté vált, és a kézmosási gyakorlatok az egészségügyi intézmények fertőzésmegelőzési intézkedéseinek lényeges elemévé váltak.