A fehérjék expressziója nagyon egyszerűen a termelés egy fehérje egy meghatározott aminosav-szekvenciát , amely viszont határozza meg egy meghatározott gén -szekvencia . Ezek megértése lehetővé teszi a szekvenciák egy nyomozó , hogy módosítsa egy fehérje különböző módon - például azáltal, hogy a címkét a fluoreszcens fehérje , így lehet kimutatni , vagy részeinek eltávolításával a fehérje, amely zavarhatja a termelés vagy feldolgozás egy sejt .
módszerek és eszközök elemzése Protein Expression
fehérje expresszióját elemeztük segítségével rendkívül bonyolult és specializált technológiák és eljárások, mint például ELISA , immunoassay , tömegspektrometria , és képalkotó . Az esetek többségében a fehérje kimutatható közvetve - például , használatával egy olyan antitest, amely kötődik hozzá , majd egy másodlagos detektáló rendszer , hogy szemléltesse azt. Egy alap fehérje kimutatási technika az, hogy a Western blot , amelynek során a fehérjét végigmenni agaróz gélen , majd átvisszük egy membránon. Ezt követően a " próbaként " , lehetővé téve , hogy egy antitest kötődni hozzá, és az antitestet ezután egy kémiai megoldás , mint például egy ezüst folt , hogy készítsen egy képet a fehérje helyét a bloton. Ez jelzi, a méret a fehérje és függetlenül attól, hogy jelen van , mint egyetlen vagy több egység. Egy másik gyakran használt módszer a fluoreszcens detektálás . A kötelező egy antitest címkéjű fluoreszcens részecske a fehérje lehetővé teszi azt , hogy láthatóvá mikroszkóppal .
Elemzése céljából Protein Expression
tanulás a kifejezés egy fehérje vizsgáló ad jelzése ahol termelődik (azaz , annak expressziós mintázata és lokalizációja ) vagy annak mennyisége (azaz a szövet-vagy sejt- szintek) . Ezt az információt használják diagnosztikai patológia , például a vizelet fehérje kimutatására annak meghatározására, hogy a beteg vese- betegségek, mint például a vese tubuláris betegség vagy diabéteszes nephropathia . A genetikai laboratóriumokban génklónozási kísérletek általában rekombináns ( genetikailag megváltozott ) fehérjék. Az elemzés ilyen szintetikus molekulák döntő fontosságú annak ellenőrzésében gén szekvenciák vagy mutációk ellenőrzése , hogy lehet vagy nem lehet kívánatos. Például a vakcinák által termelt fehérjék, mesterségesen módosított gének egységek . Ezek a fehérjék gondosan elemezni kell annak biztosítására, hogy a megváltozott géneket a megfelelő és a kívánt módon , annak érdekében, hogy elkerüljék a nem kívánt mellékhatások vagy toxikus hatásokat.
Protein Expression Analysis írta Western Blotting
elemzése fehérje expresszióját western blot segítségével egy nagyon rutinszerűen elvégzett laboratóriumi eljárást annak érdekében, hogy értékelje a tudósok gén klónozás és rekombináns fehérje termelést. Például , a molekuláris biológia és a géntechnológia , különböző fajokból származó gének (például egér és humán) vannak összekötve , és helyezzük egy bakteriális sejt , amely képes kifejezni a fehérjét . Annak biztosítása érdekében , hogy a megfelelő fehérje is keletkezik , annak expresszióját kell elemezni western blot . Western blot is használják az orvosi patológia diagnosztizálására kergemarha -kór és a HIV .
Protein Expression az áramlási citometriás elemzés
áramlási citometriás szükséges sejteket , hogy festett a fluoreszcens antitest , amely kötődik egy kifejezett fehérje felszínén vagy belsejében , egy cellába. Ezt alkalmazzák a gyógyszeripari kutatás, hogy megtalálják molekulák ( citokinek) , amelyek egyediek a konkrét sejtek és részt vesz a jelátviteli és a kommunikáció. Ez azért fontos, hogy a hatás a gyógyszer normál sejtek élettani és funkció ellenőrizni gyógyszerfejlesztés során és a klinikai vizsgálatok során.