ELISA , vagy enzimmel kapcsolt immunszorbens vizsgálatban biológiai laboratóriumi technikát használják jelenlétének kimutatására egy antigén vagy antitest . Gyakran használják az orvosi diagnózis annak meghatározására, hogy a beteg volt kitéve , hogy egy adott típusú fertőzés.
Végrehajtásához ELISA , a mintát tartalmazó — érintett antigénnel — van rögzítve , hogy egy szilárd támogatás egy edénybe . Egy megoldás a komplementer antitestet adunk az edénybe, és az antitest az antigénhez kötődik . A felesleges antitestet ezután mossuk el , így csak az antigén - antitest -kötött párokat a csészébe . Ezeket lehet láthatóvá hozzáadásával egy fluoreszcens molekula, amely az antitest kötődik , és ad le egy vizuális jelet , amit azután le lehet számszerűsíteni. Ezen a módon , a jelenlétét és mennyiségét az antigén érdekes lehet meghatározni közvetve .
Western blot
Egy Western-blot egy más típusú technikát kimutatására használják egy specifikus fehérje a mintában, és meghatározza annak méretét. Először is , a minta fehérjéket méret szerint szét gélen gélelektroforézissel . Ezen a ponton, a fehérjék nem látható szabad szemmel. A tudósok ezután át a membrán fehérjék és adjunk hozzá egy antitestet tartalmazó oldatot , hogy az antigén az érdeklődés. Mosás után a felesleges oldatot , az antitest az antigénhez kötődik a membránon.
Hozzáadása másodlagos ellenanyag hatására az eredeti , vagy primer , antitest fényt bocsátanak ki . Számszerűsítése a kibocsátott fény mennyisége lehetővé teszi a kutatók számára, hogy meghatározzák a jelenléte az antigén , annak mérete, összehasonlítva más fehérjéket és annak relatív koncentrációja .
Immunhisztokémia Immunhisztokémia
egy olyan technika, amely lehetővé teszi a kutatók számára, hogy megjelenítsék a helyét a fehérje egy szövetben mintában. Kis szelet egy mintát készítünk , és egy primer antitest , amely kötődik az antigénnel az érdeklődés, adunk hozzá. A felesleges oldatot mossuk el, mielőtt a kutatók hozzá egy másodlagos antitesttel. Ez az antitest tulajdonít az elsődleges ellenanyag-antigén párral és fényt bocsát ki , jelezve a helyét az antigén az érdeklődés.
Mikroszkópot használni a tudósok , hogy szemléltesse , ahol az antigén a sejtben. Több különböző ellenanyagok , amelyek mindegyike egy-egy konkrét fehérje , fel lehet használni , hogy meghatározzák a relatív helyét számos molekula egy cellába. Ha ez a cél , különböző színű másodlagos antitesteket használnak különbséget tenni a különböző molekulák az érdeklődés.
Áramlási citometria
fluoreszcens - sejtosztályozóval — vagy FACS — egy olyan típusú áramlási citometriával elválasztásához használt különböző típusú sejtek a megoldást. Minden más típusú sejt " címkézett " egy antitestet , amely specifikus sejttípus . Minden ilyen antitesteket bocsát ki különböző színű fény. A gép agitál a megoldást törni az egyes cseppek , és használja a szenzor érzékeli a színét minden csepp . A gép rendezi a sejtek által kibocsátott szín , elosztjuk őket típusa alapján a fehérje bennük . FACS módszer lehetővé teszi a kutatók számára, hogy rendezni, és számszerűsíteni a sejtek az érdeke, hogy a kutatási kérdésekre.
Immun - elektronmikroszkópos
Normal elektronmikroszkóppal lehetővé teszi a tudósok , hogy vizsgálja meg a szerkezet egy cella nagyított akár 1 millió alkalommal. Immun- elektronmikroszkópia tulajdonságait használja a - antitest antigénkötő hogy szemléltesse különösen fehérjék nagyon vékony szöveti metszeteken . Először is, antitestek ráerősített arany részecskéket hagyjuk kötődni az antigénhez az érdeklődés. Egy elektron mikroszkóp majd megjeleníti az arany részecskéket , így a kutatók egy kép , ahol a fehérje lokalizálódik a cellában.
Bár immun - elektronmikroszkópia egyszerű elméletben , ez technikailag nehéz és nagyon drága alkalmazni , amely korlátozza népszerűsége használatának számos biológiai kutatási programokban .