Hogyan Stain Agarose Gels

Visualization nukleinsav vagy fehérje elengedhetetlen teljesítő agaróz gél elektroforézissel . Ha a munka nem a gélt , akkor nem fogja tudni , hogy hol a minta a tesztelt elérte , ezért a mérések molekuláris méretű, például , akkor szigorúan korlátozott . Beszennyezheti a gélből egy közös , jól próbáltak színezék , mint például etidium -bromid ( EtBr ), amely alatt fluoreszkál az ultraibolya (UV) fény beiktatni , amikor a DNS-be vagy RNS -molekulák . A festék segít teljesítő a kísérlet felbukkan a molekulák a minta sötétkék jeleket. Ez az, amire szüksége van
Védőkesztyű és védőszemüveg
agaróz gél
etidium bromid
pipetta ( Gilson kis mennyiségben ) Loading buffer

Show More utasítások

1.

Viseljen kesztyűt , amely vékony, de a védő , és lehetővé teszi az ujjak és a kéz korlátlan mozgás. Egy kis pipettával felhívni néhány EtBr (vagy azzal egyenértékű festés) ki a tartályból.
2

Add 0,5 mikrogramm per milliliter a választott folt a minta . Fedjük le a mintát , és keverjük össze kézzel. Több turmixok elegendőnek kell lennie.
3

Add a negatív töltésű töltőpufferrel a mix egy pipetta . Ez lehetővé teszi, hogy a festett minta látható szabad szemmel , a természetes fényt , és feleslegessé teszi a drága , a káros UV amelyek egyébként rontja a molekulák , amely érdekli . Xilol cianol egy általánosan használt töltőpufferrel , de mások is rendelkezésre állnak. Győződjön meg róla, válassza ki a töltőpufferrel , hogy futni fog ugyanolyan sebességgel , mint a molekula , amit a mérést. Xilol cianol fut ugyanolyan sebességgel, mint a DNS -fragmenseket , amelyek 5000 bázispár (bp ) hosszúságú.
4

pipettával egy tiszta , hogy alkalmazza a fokozott mintát az üregekbe elején a agaróz gél . A kötet alkalmazza méretétől függ a gél fésű ( jó vastag és hosszú, gél vastagság ) . Folt a mintát , és nem a vezérlő , így határozza meg a paramétereket Önt érdekli ( mint például a molekulatömeg ), helyesen és hatékonyan .
5

Vagy végre Dél- blot , mert így a megjelenítő a minta . Transzfer a DNS nitrocellulóz membránon. Tegye ki a hibridizációs próba . Ez nem festés , mint olyan, hanem biztosítja a megfelelő alternatíva , amint az Access Excellence.