Alapvető Módszerek Áramlási citometria

Áramlási citometria magában elvének hidrodinamikai fókuszálás , egy gerjesztő fény forrás, például egy lézer, mérésére és elemzésére a fizikai jellemzői az egyes részecskéket. Áramlási citometria túlnyomórészt alkalmazott sejt- elemzés, és az elemzett tulajdonságok közé tartozik a cella mérete , tagoltságát és fluoreszcencia intenzitását. Essential detektálási módszerek áramlási citometriás közé előre szórt fény , oldalsó szórt fény és fluoreszcencia . Áramlási citométer

áramlási citométer az alábbiakból áll Fluidics , az optika és elektronika . A Fluidics rendszer felelős szállítására a minta áram a lézersugár kihallgatásra . Az optikai rendszer tartalmaz lézerek és optikai szűrők megvilágító minták és közvetlen fényjeleket a megfelelő detektorok. Ez az érzékelt fényt alakítja át elektromos jelek az elektronikus rendszer , az értelmezés a számítógép .
Forward - szórt fény

szórt szórt fényt előrefelé észlel körülbelül 20 fokkal a tengely a lézersugarat egy fotodióda úgynevezett előre szétszórt - csatornát ( FSC) . Előre - szórt fény egyenesen arányos a részecske felületének , és arra használható , mint egy jelző a sejt méretének és megkülönböztetni élő és az elhalt sejteket. E jellemzők miatt , FSC alkalmazzák immunfenotipizáló a kiváltó jelfeldolgozás .
Side szórt fény

Side - szórt fény utal fény megtörik a minden mobil felület, amely a mért körülbelül 90 fokos a lézersugár tengely mellé szórt channel ( SSC ), akkor átirányítja a megfelelő detektor a gerenda splitter. Oldalsó - szórt fény nagyjából megfelel a sejt vagy belső tagoltságát komplexitás , és arra használható , hogy meghatározza a szemcsés sejtek tartalmát . Side és előre szórt fény együttes alkalmazása különbséget tenni a különböző típusú sejtek.
Fluoreszcens

fluoreszcens biztosítja a mennyiségi és minőségi információk a sejten belüli molekulák , mint például a citokinek és DNS-t, és a sejtfelszíni receptorokat , segítségével fluorokrómmal és mérési címkék különböző hullámhosszakon . Minden fluorokrómmal címke egy meghatározott hullámhosszon megszólalt , ahol fény elnyelődik úgynevezett abszorpciós spektruma . A fluoreszcencia funkcionál foton a fény által kibocsátott gerjesztett elektron követően fényelnyelési .