HPLC technika

áll a HPLC nagy teljesítményű folyadékkromatográfia, egy szabványos minőségi és mennyiségi elemzést használt analitikai eljárás labs. HPLC- megbízható és megismételhető , így az előnyben részesített technikát elválasztására , azonosítására és mennyiségi meghatározására a komplex molekulák keverékei mind a kémiai és biológiai összetevők . Négy összetevő

HPLC módszer négy fő összetevője . Először is, a szállítási rendszer oldószer ( mobil fázis) , amely hordozza a mintákat az oszlopon keresztül , azért fontos , mivel a polaritás befolyásolja a rendszer azon képességét, hogy a molekulák elválasztására . A kromatográfiás oszlop általában egy függőleges üveg oszlopba , amely tele van egy adszorbensen . Másodszor, a adszorbensen ( szintén ismert, mint a stacionárius fázisban, mivel az nem mozog) általában szilikagélen vagy alumínium-oxid. Harmadszor, a mintabeviteli rendszer tartalmaz valamilyen injekciós portot , hogy bevezesse a analizálandó minta az oldószer-adagoló rendszert. A negyedik elem a detektor .
Érzékelők

alkalmazott detektor típusától függ , hogy milyen típusú minta technikusok futnak , és milyen molekulák igyekeznek elkülöníteni . A kritériumok a technikus használ, amikor kiválasztják a detektor közé tartozik a szelektivitás , a jel- zaj viszony , kimutatási határ , lineáris tartomány időállandó , a sodródás és a sejttérfogat . Általánosan használt detektorok közé ultraibolya-látható érzékelők, tömegspektrométerek , refraktív index , fluoreszcens detektor vagy párologtató fényszóródás eszközök.
Eljárás

Kapcsolja be az érzékelő , a szivattyúk (amelyek nyomást használnak hozzá , hogy mozog a mobil fázis keresztül az álló fázis) , és a számítógép , amely rögzíti és kinyomtatja a kromatogramot. Válassza ki a megfelelő programokat annak érdekében, hogy összegyűjti a kívánt adatokat . Adja be a mintát az injektor . Tartsd szemmel a nyomást. Minden típusú oszlop maximális nyomás; nem haladja meg ezt, vagy elkülönítés nem fordulhat elő. Nyomtassa ki a kromatogram és elemezni az eredményeket. A futam végén , ezért fontos, hogy pirul ki az injekciós port , hogy megakadályozzák építmény , amely létrehozhat dugulás .
Típusok

hidrofil kölcsönhatás kromatográfia használ kötött poláris állófázist és egy nem poláros, vízzel elegyedő mobil fázis elválasztásához alapuló molekulák polaritását . Ez a technika megvan az a képessége , hogy külön a savas , lúgos és semleges mintákat egyetlen fázisú kromatográfiás chromatogram.Normal használ egy poláris állófázist és egy nem-poláris, nem-vizes mozgó fázis szerkezeti izomerek elválasztására ( molekulák molekuláris képlete azonos atomokból , amelyek együtt különböző módon ) . Fordított fázisú kromatográfia a legszélesebb körben használt típus a HPLC-vel. Ez használ egy apoláros állófázist és egy vizes kissé poláris mozgófázis . Ezt a módszert gyakran használják a gyógyszerészeti vállalatokat, hogy jogosult drogok előtt release.Size kizárásos kromatográfia elválasztja molekulák méret alapján is meghatározza , és a szerkezet a csere proteins.Ion kromatográfia alapján a vonzás között az ionok az oldott anyag és a töltéssel rendelkező területek kötött az állófázis .
használ

HPLC hasznos a különböző alkalmazásokhoz. Ezt fel lehet használni , hogy elemezze gyógyszerészeti anyagok, ami hasznos új gyógyszerek kutatása , valamint a meglévők tisztítására . Azt is használják , hogy elemezzék biológiai folyadékokban , növényvédő szerek , robbanóanyagok és egyéb anyagok. Bár ez egy népszerű módszer az orvosbiológiai , biokémiai és gyógyszerészeti kutatás , akkor is használják a kozmetikai , az élelmiszer-, a környezetvédelmi és az energetikai ipar .