három fő lépésből áll: elektroforézis , amelyben a fehérje keveréket szét lokalizált alapuló sávok mérete és töltés; át , amelyben a proteineket áthelyezve polimer gélt a papír szubsztrátum; és a fejlesztés , amelyben a fehérje sávja kamat jelölt és elemezni .
alkalmazások Research
a Western blot segíthet meghatározni sejttípus .
Western blot széles körben használják az orvosbiológiai kutatásokban . Mivel a fehérjék fő mutatók sejtműködés , a Western blot információt nyújthat az sejtanyagcsere és a vonal . A rekombináns fehérje expresszió is ellenőrizni, és vizsgáltuk a Western blot .
Alkalmazások Medicine
a Western blot segíthet a diagnózis néhány prion betegségek. Western blot
munkaigényesek és időigényes, és ezek ennek megfelelően a klinikai alkalmazások korlátozott. Azonban ezek fontosak egyes betegségek diagnosztizálásában , beleértve a Lyme- kór, HIV-és prion betegségek, így például a Creutzfeldt -Jakob- kór.
Története
Mivel a polimer gél nem egy jó szubsztrát az immunkémiai hatékony átadása kulcsfontosságú volt előre.
Az első demonstrációja fehérje szétválasztás polimer gélt megjelent 1977-ben. A gyors és hatékony átadását a fehérje papírra elektrolenyomatolással - kritikus módszer ' s elfogadás - mutatták ki 1979-ben.
elnevezése
2010-től , nem volt kelet- folt .
A kifejezés “ Western blot ” része egy kissé bonyolult tudósok ' szójáték . Az analóg DNS jellemzésére eljárást nevezzük után Southern-blot feltaláló, George déli . Az RNS- változat általánosan ismert, mint a Northern blot és talán elkerülhetetlenül fehérje immunblottolással a Western blot .