Hogyan blokk Pufferek

blokkolása puffereket használnak stabilizálására bevont fehérjék immunkémiai vizsgálatokban és szerint immunkémiai Technologies, csökkentik a zajt a vizsgálatok eredményeit az egyes , növeli a vizsgálati eljárás érzékenységét , növeli a hatékonyságot és eltarthatósága a bevont lemezek és fokozza reprodukálhatóság . Blokk pufferek gátolják nemspecifikus kötődés után a fehérjék és antitestek kötik össze, és nem szívódik fel a bevont vizsgálati lemez alatt egy ELISA ( enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat). Mivel az ELISA építhető különböző módon , több választási blokkoló puffer , hogy megfeleljen a technikus egyedi igényeihez . Ez az, amire szüksége van
ellenanyag minta
Protein minta
vizsgálati lemez
blokkolópufferben
Laboratory poharak
pipetta

Show More utasítások
1

Válassza ki a blokkoló puffer attól függően, hogy milyen típusú ELISA fog ellátni . Choices puffer a következők: általános blokkolók (emlős protein állvány ), a szendvics és az antigén - ELISA le; BB2 neptune blokkoló (nem emlős protein állvány ) az emberi és emlős fajok ELISA; BB3 synblocks (kicsi , szintetikus molekuláris állványok ) nagy szilárdságú blokkoló ELISA; és foszf BB4 -mentes (kicsi, szintetikus , foszfor -mentes molekuláris állványok ) nagy , a nem - specifikus enzim - jelzett konjugátum kötődését ELISA . A BB4 puffer blokkoló kifejezetten hasznos tesztek használó alkalikus foszfatáz , vegyileg kezelt vagy üveg reakció lemezek és Mikrofluidika jelentése szerint immunkémiai Technologies , a cég, amely ellátás minden lényeges assay berendezések.
2

Kabát a vizsgálati lemez a antigén ( fehérje ), vagy az ellenanyag öntéssel megoldás az egész lemez .
3

Szívja ( eltávolítani) a bevonó oldat által borravaló a lemezt , így a felesleges dobni egy külön tartályba. 4 Matton

Pipettázzunk 300-400 mikroliter a blokkoló puffert mindegyik lyukába a vizsgálati lemez egy pipettával .
5

Inkubáljuk a megoldások körül három órán át vagy egy éjszakán át környezeti hőmérsékleten ( 4 ° C) . Az Cell Technology cég , a jobb blokk puffer megőrizni a reagensek , ami értékes lehet , mert drága , és nem elegendőek .
6

Mossuk ki a felesleges fehérje felesleges összegeket ez csökkentheti a kimutatására a megcélzott antigén által jelentett nettó Pierce . Matton

7. ezen a ponton , a reakció teljes, és akkor van egy lemez , amely kész a megfelelő mennyiségű ellenanyag antigénhez kötődik , amely megadja következetes eredményeket és csökkenti a lemez - to-plate variáció nagy, összehasonlító vizsgálatokban. Matton

8 Abban az esetben, ha a mikroarray , használni egy olyan fejlett , mint a blokkoló oldatot Array Ez blokkolása azt Buffer, amelyet kifejezetten inaktiválása olyan reakcióképes csoportok maradnak követően a "print " szubsztrátok a diák , amely szuper- epoxi , szuper -amin és szuper - aldehid , miközben megőrzi élességét eredő jel , megakadályozva fluoreszcencia és megkönnyíti a zaj csökkentésére. Ez a reagens egy szavatossági ideje egy év, ha megfelelő módon tárolt , rendkívül tiszta , és van feltéve mint egy kész használható koncentrátum .