Hogyan mérjük Protein Expression

Fehérje kifejezés intézkedés a nyomokat a tevékenységét a gének a szervezetben , mert a fehérjék működnek , mint a végső katalizátor a sejtek tevékenységét. Szerint azonban egy cikket a március 2010 kérdés a " LabMedicine , " patológusok és biológusok még megállapodni világoslátótér mikroszkópos és fluoreszcens mikroszkópia a leginkább megfelelő módszer mérésére fehérje expresszióját . Egész - dia világoslátótér szkennelés nem csak a könnyen használható, és Chromogen stabilitást , de védeni üveglap hosszabb. Ez az, amire szüksége van
Cell szövet
Slide
biotinilált másodlagos antitesttel
Streptavidin- torma peroxidáz
3,3 ' - Diaminobenzidine
Color Line -scan kamera
Show More utasítások
1

Helyezze a szövetekbe a dia , és adjunk hozzá egy biotinilált másodlagos antitesttel , majd streptavidin- torma peroxidáz és várjon két percig.
2

Öntsünk négy csepp 3,3 '-diaminobenzidin a minta , és várjon két percet, hogy a barna folt terjedni teljesen a minta .
3

Tegyünk egy szövettani része a festett címpéldány egy motoros platform egy jól megvilágított szobában . Óvatosan állítsa be a színes vonal -scan kamera 20X vagy 40X nagyítás és végig a minta . Állítsa be a csíkok a kép , és tömöríti a digitális kép egy olvasható fájl mérete .
4

nyomtatása a digitális kép kézi elemzés vagy takarmány a képet a számítógépes szoftver technológia segített elemzése . Vegye figyelembe a minta a foltok bemutatott kép . Alaposan elemezzék fehérje expressziója alapján a mintákat a foltokat a minta .
5

Értékelje a fehérje expressziója a rákos sejteket, és stroma vizsgálatával koncentrációja fehérje kifejezte a szövetekbe .

6

a színes minták számszerűsíteni a fehérje expresszió skálán 0-tól 3 + . Használja a pontszám kiszámításához HER- score vagy Allred pontszám .