Hogyan készítsünk LB agar

Agar egy kocsonyás anyag , gyártott vörös algák és használják különböző célokra . Az egyik a közös felhasználások a tenyésztési közeg a baktériumok számára. LB- agar -agar tápanyag , amely már kombinált lysogeny húsleves ( LB) . Ez egy általánosan elterjedt tévedés, hogy LB áll a Luria - Bertani . Ugyanakkor a feltaláló, Giuseppe Bertani , állítja tanulmányában " Lysogeny a huszadik század közepéig : P1 , P2 , és egyéb kísérleti rendszerek , hogy" a kezdőbetűket mindig célja állni lysogeny húsleves , és nem az ő nevét, és hogy az ő coresearcher , Salvador Luria . LB agar sokoldalú és viszonylag egyszerűbb a kezelésük. Ez az, amire szüksége van
1 l kész közeg :
Scale és súlyú papírok vagy tálcák
1 -L mérőhengerben
1 liter desztillált vagy ioncserélt víz
2 -L Erlenmeyer lombik
10 g tripton
5 g élesztőkivonat
5 g noniodized konyhasó
15 g agar
alumínium fólia
Vízálló sütőt ujjatlan
Autoclave vagy kukta
steril Petri- lemezek

Show More utasítások
1. Használjon egy Erlenmeyer-lombikba , amely tartja kétszeres mennyiségű közép kíván készíteni .

Helyezze a tripton , élesztőkivonat és a sót az Erlenmeyer-lombikba .
2. kiemelt figyelmet szenteljen a nyomás az autokláv vagy a kukta , ha sterilizáló .

hozzá a desztillált vagy ioncserélt víz és uram , vagy rázza , hogy feloldódjon a legtöbb száraz hozzávalókat.
3

Adjuk hozzá az agart , és továbbra is rázza vagy keverje . Minden agar nem oldódik , de fontos, hogy kap a legtöbb belőle oldatba . Kerülje a nagy csomókat a fel nem oldott agar telepedett alján a lombik .
4

Zárja le a nyitás a lombik fóliával .
5

Helyezzük a lombikot autoklávban - tokba.
6

Öntsön körülbelül 1 cm-es víz a tartályba .
7

Tegye a tartályt és lombik az autokláv . Állítsa be az autoklávba , és sterilizáljuk folyékony ciklus legalább 20 percig. Ha a kukta a sterilizálás , folytassa a 8. lépéssel . Ellenkező esetben ugorjon a 10. lépéssel .
8

Ha a kukta , tegyen egy kis mennyiségű vizet a tűzhely és a helyezzük a lombikot a vízben. Ne próbálja meg sterilizálni több mint 250 ml egy időben ezzel a módszerrel .
9

Hozd a kukta mintegy 20 psi és sterilizálja körülbelül 30 percig .
10

Vegyük ki a lombikot az autokláv vagy a kukta , ügyelve a lombik lesz elég meleg.
11

Rázzuk a lombikot óvatosan , ha sterilizálás befejeződött. Ez fogja terjeszteni a agar egyenletesebb az egész megoldás.
12

Tegye a lombikot a megfelelő felületre, és hagyja hűlni egy kicsit. Ha már kész 1 liter vagy több közepes , hogy ez egy szelíd örvény minden 10 és 20 perc . Ön képes lesz arra , hogy elmondja , hogy a médium nem hűlt elég , ha tudja tartani a hátsó ujjaival ellen a lombikot körülbelül 2 másodpercig anélkül, hogy kellemetlenül meleg tapintású. Várjon körülbelül 15 és 20 perc , mielőtt ezt.
13

Tegyünk egy Petri-csészében egy sima felületre . Óvatosan emelje fel a fedelet szögben , úgy, hogy a legtöbb étel marad fedett . Ne emelje fel a fedelet egyenesen a lemez .
14

Öntsük a közeg a lombikból a Petri- csészében , amíg az étel körülbelül félig tele van.
15

Azonnal cserélje a fedelet , mozog a lap félre, és lépni a következő , amíg az összes kívánt lemez betöltötték. A lemezeket fogja befejezni a megszilárdulás mintegy 30 perc alatt .
16

Helyezze a Petri-csészék , a steril tasakban, amelyben érkezett, vagy más alkalmas steril tartályba ha nem beoltani őket azonnal . Zárjuk le a tartályt , hogy megőrizze a nedvességet. Jelöld a lemezeket, ha szükséges. Ha tárolja a lemezeket , akkor meg kell tartani a hőmérséklet körülbelül 39-40 fok F.