Egészség és a Betegség
Kapcsolja be a spektrofotométer és állítsa hullámhossza 620 nm . Hagyja a készüléket bemelegedni legalább 10 percig, hogy a válasz lesz stabil a kísérlet során .
2
a hat kémcsövek , megbélyegzi 1-6 , és helyezd el őket egy teszt cső rack. Rendezzük megoldások keményítő , de- ionizált víz -és KI /jódoldatot a pad tetején .
3
Töltsük cső 1 3 ml ionmentes vízzel és egy pipetta; ez szolgál majd az üres . Töltsük csöveket 2-6 , 3,0 ml , 2,9 ml , 2,7 ml , 2,4 ml és 2,1 ml ionmentes víz volt. Hozzáadás keményítő oldattal minden a csövek 2-6 , az alábbi sorrendben : 2 cső jelentkeznek 0 ml , 3 cső kap 0,1 ml , 4 cső kap 0,3 ml , 5 cső jelentkeznek és a cső 0,6 ml 0,9 ml 6 jelentkeznek .
4
adjunk hozzá egy csepp KI /jód megoldást mind a hat cső . Óvatosan keverje minden cső előtt alaposan felvétel a abszorbancia spektrofotométerrel .
5
Töltse fel a küvetta az üres oldattal tisztítsa meg kívülről a küvetta és helyezze az üres lyuk a spektrofotométer . Állítsa be a abszorbancia nullára . Minden más megoldás fog járulni a pozitív abszorbancia .
6
Töltsük meg a mintaküvettát minden , a többi öt megoldás viszont . Törölje ki a küvetta minden mérés előtt . Jegyezze fel az abszorbancia értéket minden csőbe. Öblítse le a küvetta az új megoldás legalább egyszer kitöltése előtt a vizsgálathoz.
7
Készíts egy grafikon ábrázolja az abszorbancia értékek ellen keményítő koncentrációt. Ez a standard görbe , amely lehetővé teszi , hogy meghatározza a koncentrációját a megoldás, hogy egy adott abszorbancia olvasás .
Meghatározása amiláz koncentráció
8
tisztítsa meg a kémcsövet a az első része a vizsgálatot. Őrizze meg az üres csövet későbbi használatra .
9
vérmintát veszünk a beteg . Helyezzük a mintát egy centrifugában , és külön a vörös vérsejteket a vérplazma. Matton 10
Töltsük egy kémcsőbe 9 ml ionmentes vizet és 1 ml-t a vérplazma. Ez egy 1:10 hígítása a plazmában. Keverjük össze a csövet alaposan és pipettával 1 ml oldatot egy második kémcsőbe. Jelöld a két csövet és azok tartalmát .
11
Készülj , hogy végre egy időzített tesztet . Van egy stopper praktikus és felállított hét kémcsövek küvettákhoz a kémcsőben rack. Akkor veszi mért két percenként , ha a teszt elindul . Jegyezzük fel a pontos időt, és abszorbancia leolvasást az egyes adatpontok a hét . Töltsük a hét minden egyes kémcsövek 2 ml ionmentes vízben.
Matton 12 9 ml hozzáadása a keményítő- oldatot a kémcsőbe , amely a 1 ml 1:10 hígítású plazmában. Amint elkezd hozzá a keményítő-oldattal , indítsa el a stopper . Keverjük össze a vizsgálati cső is , és 1 ml-es pipettával a keményítő /plazma oldatot az első hét kémcsövek. Jegyezze fel az időt. Adjunk hozzá 1 csepp KI /jód oldatot a kémcsőbe , és keverjük össze .
13
Transzfer a küvetta , törölje le a külső , és rögzítse az abszorbancia . Ismételje meg a folyamatot a fennmaradó hat kémcsöveket két perces időközönként. A következtetés az időzített tesztet kell olvasmányok az aktuális időt és abszorbancia az idő ível 0 , 2, 4 , 6, 8 , 10 és 12 perc .
14
a standard görbe , hogy megtalálják a keményítő koncentrációját az egyes adatpontok a hét . Ezek a pontok akkor csökken az idő. Az amiláz megemészti a keményítőt és idővel fogyasztja az összes keményítő elérhető.
Matton 15 grafikon az adatpontok az időzített vizsgálati koncentráció mint a keményítő idő függvényében . A meredeksége görbe mennyiségét mutatja amiláz a plazmát .