A jegyzőkönyv TMRE

tetrametil etil-( TMRE ) egy " lassú, lipofil , kationos reditribution fluoreszcens festék" használt MitoPT ™ TMRE /TMRM mitokondriális membrán potenciál értékelése Kit, által gyártott immunkémiai Technologies, LLC. A folyamat segít , hogy megtekinthesse a transzmembrán elektromos potenciál gradiens a sejtekben. Előkészítése vizsgálati

A protokoll egyszerű követni , és körülbelül 20 perc alatt feldolgozni 37 Celsius fok. Az élő sejtek a vizsgálatban használt vehet között több óra és több nap előkészítése a használatra. A kontroll sejtek több óráig is eltarthat készíteni , mivel meg kell rávenni, hogy apoptózist .
Jegyzőkönyve 1. rész

Kultúra sejtek sűrűsége optimális az apoptózis , vagy oxidatív stressz indukció , az Ön egyedi indukció protokoll , de nem haladja meg a 10 (6 ) sejt /ml .
jegyzőkönyve 2. rész

azonos idő , a kultúra nem indukált negatív kontroll sejt populáció ( azonos sűrűség , mint az indukált lakosság .
jegyzőkönyve 3. rész

apoptózist, vagy szándékosan depolarizálá mitokondriumok következő a kívánt protokollt .
jegyzőkönyve 4. rész

Készítsen 1X vizsgálati /Wash Buffer .
jegyzőkönyve alkatrészek 5-8

Készítse elő az 1 mm vagy 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM raktáron. protokoll 6. rész , készítsen egy 1:100 hígítású 1 mM vagy 1:20 hígítás 0,2 mM MitoPT ™ TMRE /TMRM megoldás addíciós cellába kultúra mintákat .

Protocol 7. rész, folt sejtek egy végső 20-200 nM koncentrációjú MitoPT ™ TMRE /TMRM megoldás.

Protocol 8. rész , elemzi a adatokat.