Egészség és a Betegség
Sugárzás hibrid térképezés egy génsebészeti folyamat, amely eredetileg a hosszú távú építésére térképek emlős kromoszómák és felfedezni a helyét a genetikai markerek egymáshoz képest . Sugárzás hibrid leképezés gyökerezik a statisztikai modell mérésére közötti távolság dezoxiribonukleinsav (DNS ) markerek és azok sorrendjét a kromoszómák . DNS markerek nagyon rövid. Ciklikus DNS szekvenciák között található egy genomban. Sugárzás hibrid térképezés bebizonyította, hogy nélkülözhetetlen az emberi betegség gének lokalizálására a genomban. A relatív helye ezeknek a DNS- markerek eredményezték a fizikai térkép ismert genetikai térképet .
Steps of Radiation hibrid technika
Az első lépés a sugárzás hibrid amplifikációs technika magában foglalja a DNS- és tisztítása hasonló az első lépés minden szekvenálási projektben. Sugárzás ezután alkalmazunk , hogy szét a DNS-t , és ezek a kisebb szegmensek szegmenseket ezután építeni egy hibrid sejt . A sugárzás hibrid sejtet azután tenyésztjük termeszteni kell nagy mennyiségben. Polimeráz láncreakció ( PCR) és a kapcsoltsági analízis arra használják, hogy oldja meg a távolságot a DNS- markerek. Könnyedén ellenőrizheti a jelenléte a különböző genetikai markerek . Minél közelebb van a két genetikai markerek van egymáshoz , annál kisebb a valószínűsége , hogy kell elválasztani a DNS - hasító sugárzás .
Eljárás /technika
az eljárás a sugárzás hibrid technika magában foglalja a használat két különböző sejt- vonalak, amelyek nem képesek a túlélésre egy mérgező média. Azonban géneket tartalmaznak , amely képes ellenállni a mérgező anyagok , ha együtt egyetlen cella ( miatt egy toxin termelését rezisztens enzim). A vizsgált sejtvonal besugározzuk (általában az X -Ray ) , ami a DNS- törések . Ez okozza , hogy a kromoszóma szegmensekre törik szét , amelyek később kondenzált vagy integrálva a többi sejtvonal , ami egy hibrid. Mivel a hibrid beépítette gén mindkét sejtvonal és a szükséges enzim , akkor túléli a mérgező anyagok .
Termesztése
hibrid sejt, amely képes túlélni most termesztik nagy mennyiségben . Ez felerősíti a DNS-t örökölt a besugárzott sejtvonal . A kapott mintát ezután vetjük alá PCR- amplifikálására két specifikus genetikai markerek. A futás a PCR-termékeket gélen , akkor lehet ellenőrizni , ha a mindkét marker vannak beépítve a kapott sejtvonalban. A frekvenciákat , amellyel a DNS markerek megmaradnak az egyes clone ( művelt minta ) kiszámítható statisztikai módszerekkel .
Alkalmazás
generált térképeket kromoszómák a több faj mint például emberben , patkány , egér és egyéb genomok megkönnyítése generációs nagyon részletes és pontos térképeket használt tanulmányozása többtényezős betegségek. Egyéb alkalmazások közé meghatározását kromoszóma helyszínen 26 ember új teljes hosszúságú cDNS ( kromoszomális DNS ) .