Protokoll az transzfektálását GFP

a zöld fluoreszcens fehérje forradalmasította a molekuláris és a sejtbiológia , ez lehetővé tette a kutatók számára láthatóvá sejtek és fehérjék módon soha nem lehetséges. Ennek hatása a tudományos kutatás volt, olyan mély, hogy a 2008-ban Osamu Shimomura elnyerte a kémiai Nobel-díjat az ő felfedezése és elkülönítése GFP fluoreszkáló medúza . Meghatározások

gén szekvenciájának dezoxiribonukleinsav sejtekben , amely felelős a termelés egy specifikus fehérje . A plazmid olyan külön darab , amely tartalmazza a DNS- gént , mint a GFP-t. Transzfekció a módszer bevezetésére sejtekbe plazmid .
Módszerek

Transzfekció általában magában foglalja olyan DNS- keverési gént tartalmazó plazmidot , úgymint GFP lipidekkel vagy sókat. A sejteket ki vannak téve ezt a megoldást , amely megteremti lyukak a sejtmembránban , amely lehetővé teszi a plazmid a sejtbe , ahol a gén lehet kifejezett fehérje. Kereskedelmi transzfekció készletek állnak rendelkezésre , vagy a reagenseket lehet egy laboratóriumban. A választás a transzfekciós módszer típusától függ a sejtek és plazmidok használják. A GFP láthatóvá és ellenőrzi , ha a berendezés érzékeli a fluoreszcencia .
Használ

GFP általában csatlakozik egy érdekes fehérjét transzfekcióhoz . A Nobel-bizottság különválasztják a nyomon követése " idegsejt- károsodás során Alzheimer-kór " és a "hogyan inzulintermelő béta- sejtek jönnek létre a hasnyálmirigyben növekvő embrió " példaként .